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科研平台—流式细胞技术平台
    来源:本网站 发布日期:2016-07-13 点击量:3533

1、平台介绍

流式细胞技术(flow cytometry,FCM)是利用流式细胞仪进行的一种单细胞定量分析和分选技术。流式细胞术是单克隆抗体及免疫细胞化学技术、激光和电子计算机科学等高度发展及综合利用的高技术产物。

流式细胞仪的工作原理是使悬浮在液体中分散的经荧光标记的细胞或微粒逐个通过样品池,同时由荧光探测器捕获荧光信号并转换成分别代表前向散射角、侧向散射角和不同荧光强度的电脉冲信号,经计算机处理形成相应的点图,直方图和加三维结构图像进行分析。

用于FCM的样本是单细胞悬液,可以是血液、悬浮细胞培养液、各种体液、新鲜实体瘤的单细胞悬液以及石蜡包埋组织的单细胞悬液等。

 

2、平台仪器

(1)bd cantoII 流式细胞仪

该流式细胞仪性能可靠,结果精确,可支持高达8色的流式分析需求。

FACSCanto平台的使用变得更加简便,功能更强大,效率也更高。例如,固定的流动室设计使得开机设置的时间大大缩短,数据重复性更高。而专利的光路设计则进一步增强了信号检测能力,尤其在多色实验中,每一个颜色的检测灵敏度和分辨率进一步得到提升。

(2)Beckman MoFlo XDP超速流式细胞分析分选系统

超速流式细胞分析分选系统可对复杂样本中的细胞进行鉴定、分类、定量和分离,单次可同时对其中一种到四种特定细胞进行超高速分选纯化、高通量单克隆 分选或细胞芯片制备。分选后的细胞能直接用于培养、移植、核酸提取、单细胞PCR扩增或原位杂交等,可进一步进行细胞基因、蛋白、功能水平的研究和不同细 胞之间的差异化研究。硬件中样本细胞丢弃的比例低于5%,保证样本中目标细胞的高回收率。

 

3、服务内容:

1) 细胞表面分子的检测与分析; 

2) 细胞内或细胞核内抗原检测与分析——如胞内细胞因子、调节性T细胞(Treg,CD4+CD25+Foxp3+); 

3) 细胞凋亡的检测与分析——如PI单染法、Annexin-V-PI复染法、末端转移酶标记技术(TUNEL); 

4) DNA含量检测与细胞周期的分析; 

5) 细胞增殖的检测与分析。

6) 细胞分选等。

 

4、应用领域 

流式细胞术在很多领域中都有应用,包括分子生物学、病理学、免疫学和海洋生物学等。如分子生物学中,主要用于荧光标记的抗体。特异性的抗体与靶细胞 上的抗原结合,能够通过流式细胞仪研究这些细胞的特别信息。这在医学(尤其是器官移植、血液学、肿瘤免疫学和化疗、遗传学)中具有很广泛的应用。